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价格:面议 2025-09-08 07:58:01 19次浏览
琼脂糖凝胶电泳(Agarose Gel Electrophoresis)
支持介质:琼脂糖(从海藻中提取的多糖,加热溶解后冷却形成多孔凝胶)。
核心特点:孔径较大(50-200nm)、操作简单、分辨率适中、成本低。
适用对象:大分子物质,如核酸(DNA/RNA)(常用 1%-2% 琼脂糖凝胶分离 100bp-50kb 的 DNA 片段)、大型蛋白质复合物。
典型应用:
DNA 片段分离(如 PCR 产物鉴定、酶切片段分析);
核酸纯化(切胶回收目标 DNA 片段);
琼脂糖凝胶电泳结合 EB(溴化乙锭,已逐步被更的 SYBR Green 替代)染色,可直观观察核酸条带。
前处理(关键:保证工件表面洁净,决定涂层附着力)
脱脂:用碱性脱脂剂(如氢氧化钠、表面活性剂)去除工件表面的油污、灰尘(可采用喷淋或浸泡,温度 50-60℃,时间 5-10 分钟)。
酸洗 / 除锈:针对钢铁工件,用盐酸、硫酸溶液去除表面氧化皮和锈蚀(时间 3-8 分钟,需加缓蚀剂防止过腐蚀)。
磷化:工件浸入磷化液(如锌系、锰系),表面形成一层致密的磷酸盐薄膜(厚度 1-5μm),增强涂层与金属的附着力,提升耐腐蚀性(温度 30-40℃,时间 5-10 分钟)。
水洗:用去离子水多次清洗工件表面残留的化学药剂,避免污染后续电泳槽液(通常需 3-4 道水洗,后一道为纯水洗,电导率<10μS/cm)。
烘干:在 80-120℃烘箱中烘干工件表面水分(时间 15-30 分钟),避免电泳时出现气泡或涂层不均。
水洗 1(脱脂后)
目的:冲洗工件表面残留的脱脂剂,避免带入后续酸洗 / 磷化槽。
工艺:常温水洗,时间 1-2 分钟,可采用喷淋方式提率。
控制:水洗后工件表面 pH 值应接近中性(6-8)。
磷化处理
目的:在工件表面形成一层均匀致密的磷酸盐结晶膜(厚度 1-5μm),增强电泳涂层的附着力和耐腐蚀性。
工艺:浸入磷化液(常用锌系、锰系),温度 30-45℃,时间 5-10 分钟(喷淋磷化效率更高)。
关键:磷化膜应呈灰色或浅灰色,结晶均匀,无露底、发花现象(通过检测膜重:2-5g/m²)。
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